50个制备剂：QIAamp迷你柱、管延长器（20毫升）、QIAGEN蛋白酶K、载体RNA、缓冲液、Vac连接器和采集管（1.5毫升和2毫升）

特点

• 浓缩的核酸，高上样量，低洗脱体积
• 高效回收DNA和RNA碎片
• 无需有机提取或乙醇沉淀
• 完全去除污染物和抑制剂

产品详情

QIAamp循环核酸套件大大简化了从血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA的过程。

绩效

分析血液中肿瘤特异性的胞外DNA片段和mRNA可对普通血液样品进行特异性地肿瘤类型检测。这些存在于血清或血浆中的游离核酸，通常都是<1000 bp（DNA）或<1000 nt（RNA）的片段。此外，小至21 nt的miRNAs可作为某些癌症和疾病状态的生物标记。

QIAamp循环核酸套件可从人类血浆、血清和其他无细胞体液中高效纯化游离核酸。纯化效率高、重现性好、产量高（参见“循环DNA的可重复性回收”）。应用延长的上样管和真空装置QIAvac 24 Plus可将样品处理量提至5 ml，洗脱体积可在20–150 μl之间灵活变化，可浓缩低浓度核酸。该试剂盒采用先进的技术，硅胶膜选择性的结合目标核酸，提高片段化核酸的回收率（参见“Improved recovery of fragmented DNA”）。

使用RNase-Free DNase Set进行DNA柱上消化，纯化获得不含DNA的游离RNA 。特别设计的流程确保高效纯化诸如miRNA等小RNA（参见“循环miRNA高效纯化”）。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit高效纯化甲基化DNA，经纯化的DNA维持其甲基化状态，可进行亚硫酸氢盐转化实验，进行甲基化状态分析（参见“甲基化DNA高效回收”）。

经纯化和浓缩的游离DNA和RNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可即用于各种下游应用，包括：

• PCR 和定量实时PCR以及RT-PCR
• 用于基于血液样品的癌症生物标记的研究、验证和检测
• 病毒核酸检测

原理

QIAamp循环核酸套件简化了从血浆或血清中纯化游离DNA和RNA的过程。 无需苯酚-氯仿抽提。 核酸特异性结合到QIAamp Mini离心柱上，污染物流走。 PCR抑制物，如：二价阳离子和蛋白，可通过三步有效的洗涤步骤被完全去除，结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。 使用QIAamp Circulating Nucleic Acid技术从人类血浆、血清或尿液中获得游离的DNA和RNA。

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit 有可选择性结合的硅胶膜和20–150 μl灵活的洗脱体积。使用RNase-Free DNase Set进行DNA柱上消化，可纯化游离RNA。

程序

QIAamp Circulating Nucleic Acid的流程包括4步（裂解、结合、洗涤和洗脱），使用QIAamp Mini离心柱在真空装置上处理。简单的操作适用于同时处理多个样品，可在2小时内处理24个样品。QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit有待使用者验证是否能适用于所有的病毒种类的RNA和DNA纯化。

应用

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从含含低浓度DNA和RNA碎片的原始样本（人血浆中常规游离DNA的浓度为1–100 ng/ml）中纯化和浓缩游离的DNA、RNA、miRNA，包括病毒核酸。起始样本体积至多5 ml。

QIAamp循环核酸套件可从以下样本类型中纯化和浓缩核酸：

• 人类血浆
• 血清
• 尿液

辅助数据和图表

循环中miRNA的高效纯化。

循环RNA使用QIAamp循环核酸试剂盒从4毫升的混合血浆中纯化，洗脱体积为50微升。标准试剂盒方案与miRNA专用方案进行了比较。miRNA 30b产率通过TaqMan微小RNA测定法（Applied Biosystems）定量，miRNA 16产率则用人类miScript测定仪（QIAGEN）定量。下CTmiRNA协议的数值表示miRNA物种的产率更高。

增强了碎片化DNA的回收率。

循环DNA使用QIAamp循环核酸试剂盒从5毫升血浆中纯化，或使用QIAamp MinElute病毒真空试剂盒从1毫升血浆中纯化，洗脱体积为100微升。通过使用QuantTect多重PCR套件，对18S rRNA基因内66碱基和500碱基扩增子进行双重PCR实时PCR定量。500碱基对扩增子与66碱基对扩增子的差异显示DNA被碎片化，导致完整的500碱基靶序列丰度低于较短的66碱基对靶。（注意，这种差异大于样本输入量的五倍差异。）

循环DNA的可重复回收。

等量的DNA片段（200碱基对和1000碱基对）被添加到24个血浆样本中。使用QIAamp循环核酸试剂盒从5毫升血浆中提取DNA，洗脱体积为80微升。通过使用QuantiTect多重PCR试剂盒对每个DNA片段特异性66碱基靶点进行双链实时PCR定量。

高效回收甲基化DNA。

使用QIAamp循环核酸试剂盒（洗脱体积为45微升）从4毫升血浆中纯化了掺毒甲基苯丙DNA（甲基苯丙胺DNA）和非靶向多ARNA。亚硫酸盐小氯化物转换使用EpiTect亚硫酸盐试剂盒（QIAGEN）完成，甲基化特异性PCR检测（MSP）则利用实时MSP检测法及QuantiTect多工PCR套件的组分在ABI PRISM 7900HT序列检测系统上完成。分析了两个完全甲基化位点的数据。

规格